蛋白純化系統(tǒng)原理

1.分子親和純化
分子親和純化是利用目標(biāo)蛋白與特定配體之間的特異性相互作用進行純化的方法。在蛋白純化系統(tǒng)中，可以通過在柱內(nèi)填充具有親和性配體的樹脂來實現(xiàn)分子親和純化。當(dāng)樣品通過柱時，目標(biāo)蛋白與配體發(fā)生結(jié)合，其他雜質(zhì)蛋白被洗脫。隨后，通過改變洗脫緩沖液的條件，使目標(biāo)蛋白從親和樹脂上解離下來，實現(xiàn)純化。
2.離子交換純化
離子交換純化是利用蛋白與固定帶電基團之間的電荷相互作用進行純化的方法。在蛋白純化系統(tǒng)中，可以通過在柱內(nèi)填充具有帶電基團的離子交換樹脂來實現(xiàn)離子交換純化。樣品通過柱時，目標(biāo)蛋白與樹脂表面的帶電基團發(fā)生電荷相互作用，使目標(biāo)蛋白被吸附在樹脂上。隨后，通過改變洗脫緩沖液的離子強度或pH值，使目標(biāo)蛋白從離子交換樹脂上解離下來，實現(xiàn)純化。
3.凝膠過濾純化
凝膠過濾純化是利用蛋白分子的大小差異進行分離純化的方法。在蛋白純化系統(tǒng)中，可以通過在柱內(nèi)填充具有特定孔徑的凝膠顆粒來實現(xiàn)凝膠過濾純化。樣品通過柱時，目標(biāo)蛋白由于其分子大小與凝膠孔徑的匹配而通過，而大分子的雜質(zhì)被凝膠顆粒阻滯在柱中，從而實現(xiàn)純化。